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发布时间:2022-02-11 19:03:00 作者:浩连科技
3~5分子的生物素与1分子的蛋白结合实验实验步骤:
1. 溶解2~10 mg 蛋白于1 ml 的BuphTm磷酸盐缓冲液中,并计算溶解的毫摩尔数。如果蛋白含有不恰当的缓冲液(如Tris或者甘氨酸),可以通过在PBS中透析或浓缩的方法除去。计算:蛋白质量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白质的毫摩尔数。
2. 在打开之前,平衡生物素至室温。加2 mg Sulfo-NHS-Biotin于100 ul 超纯水中,加入足够量浓度的生物素,一般对于10 mg/ml 蛋白来说超过12倍分子数,对于2 mg/ml 蛋白溶液应超过20倍,或者该试剂也可以直接以粉末的形式加入蛋白溶液中
3. 室温30分钟,或冰上放置2小时。
4. 用30 ml PBS预洗纯化柱,上样,加入与欲收集量相同的缓冲液,收集0.5 ml 或1 ml 于单独的管中。
冰箱保存时间不超过2个月
原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。在常温下(15℃~25℃)保存时间一般不超过2个月。超过2个月要重新标定或检查之后再用。按规定配制并消毒好培养基,冷至室温,保存在阴暗处(尽可能贮藏在冰箱内),配制好的培养基应在1个月内用完。
密封适用于易挥发、升华、潮解、稀释、风化、水解和氧化还原、霉
密封适用于易挥发、升华、潮解、稀释、风化、水解和氧化还原、霉变的化学试剂,对于极易分解产生气体的试剂,一般不完全密封,要适当留有余地,否则可能使容器。除了一般密封外,可再加蜡封,或用自制硝罗酊封口,如:、等。
能和空气、水作用的试剂,如:很活泼的金属和非金属应隔离存放在对试剂相对而言稳定的液体或惰气之中,钾、钠、钙浸没在机油中,则浸没在水中贮放。这种隔离方法也称液封法,前者叫油封,后者叫水封。
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